抗氨芐青霉素大腸桿菌的分離、培養及計數

 接下來喆圖小編就來說說抗氨芐青霉素大腸桿菌如何進行分離、培養和計數及實驗所需材料和藥品 ：

  待分離的大腸桿菌菌液、高壓蒸汽滅菌鍋、LB固體培養基、LB液體培養基、接種環、玻璃三角刮刀、培養皿、恒溫培養箱、搖床、超凈工作臺、酒精燈、9ml無菌水、移液槍

  1、實驗需要制備并使用選擇培養基：選擇培養基是指根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選效率。

   2、分離單克隆菌落采用平板劃線法：通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面，在數次劃線后培養，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，即菌落。  

   3、使用LB液體培養基并放置在恒溫培養箱中培養單克隆菌落以達到擴大培養的目的。  

   4、稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液（10^5,10^6,10^7）分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。 在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個菌落。  

    5、用無菌水稀釋菌液：取一毫升液體培養基基液加入一瓶含有9ml 的無菌水中，放入恒溫振蕩器中震蕩使液體充分擴散。取震蕩后溶液中的1ml液體加入另一瓶無菌水中，震蕩，重復此步操作，進行梯度稀釋，每一步濃度稀釋到之前的十分之一。

     6、計數時，選擇未污染的培養基計數。使用記號筆在培養基表面標記，并使用計數器計數菌落個數。

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