液晶生化培養箱測定土壤菌群的實驗

    接下來喆圖小編給大家講講用液晶生化培養箱進行水中土壤菌群的測定
    本方法適用于工業冷卻水中土壤菌群的測定,也適用于原水、生活用水及其他水中土壤菌群的測定.基本方法是采用混合培養基,利用平皿計數技術,在液晶生化培養箱中培養72小時,測定循環冷卻水中土壤菌群的總數。下面喆圖小編給大家介紹一下具體步驟。
測定步驟

水樣的采集

     用無菌采樣瓶采集被測樣品，在采樣過程中，要保護瓶口和瓶頸，防止這些部分受雜菌污染。瓶內要留下足夠的空間，以備測定之前搖晃。

     若采集的水中有余氯，應于采樣前在無菌操作下于無菌采樣瓶中加人滅過菌的硫代硫酸鈉，加人量為每升水樣約0.1g。

     水樣采集后應立即進行測定，如果2h內不能進行測定，應把水樣放在冰箱中，于4℃~10℃保存，保存時間不宜超過24h。經冷凍保存后的水樣需測定時，從冰箱中取出于30℃左右活化4h~5h，再進行測定。

     無菌箱(室)滅菌，把實驗所用的無菌稀釋水、無菌培養皿、無菌吸管等用品放人無菌箱(室)內，打開紫外線燈滅菌30min。

     水樣的稀釋和接種，關掉紫外線燈，打開熒光燈，將待測水樣放人無菌箱(室)中，立即用75%的乙醇溶液浸泡的醫用脫脂棉球擦手，點燃無菌箱(室)內的酒精燈。

    以下對水樣的稀釋和接種條的操作應在無菌室內的火焰區進行。

     選擇適宜的稀釋度，應使MAX后一個稀釋度接種后培養皿中生長的菌落數小于300個，在空白稀釋水樣瓶上標上稀釋度數。

     用10倍稀釋法稀釋水樣，即用5mL無菌吸管吸取5mL水樣注入到45mL空白稀釋水中充分搖勻，此時稀釋度為10-1.

     另取一支5mL無菌吸管吸取5mL10-1水樣移人到第二個稀釋水中，充分搖勻，此時稀釋度為10~2，依次類推，直至需要的稀釋度為止。

     將不同稀釋度的水樣分別接種到無菌培養皿中，每個稀釋度重復接種3~5個皿，每皿接種1mL，接種時左手掌托住培養皿，大拇指和食指輕輕將培養皿提起，吸管與培養皿底成45°角相接。移開吸管時吸管不宜再碰到培養皿。接種時間不宜超過4s。每接種一個稀釋度更換一支無菌吸管。另取一組培養皿不接水樣，作為空白。同時操作。

     將滅過菌的培養基冷卻至(45士1)℃，掀開培養皿蓋，將培養基灌入培養皿內，每皿應灌15mL~20mL。灌皿時不要使培養基直接灌在水樣上，灌皿后要將融化的培養基和皿中水樣*混合， 小心勿使混合液濺到培養皿的邊緣， 測定一個水樣從接種到灌皿不得超過20min。

培養

     待培養皿中培養基固化后，倒置平皿，在液晶生化培養箱中29℃培養72h。

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