如何確保二氧化碳培養箱正常工作

       避免污染
 
       哺乳動物細胞是在營養豐富的培養基中培養的，溫度有利于幾乎任何微生物的生長，無論是想要的還是不需要的。盡管許多研究人員在他們的培養基中使用抗生素和抗真菌劑作為預防污染的措施，但這并不能解決持續的方法學錯誤，并常常隱藏了存在問題的事實。如果可能的話，避免使用這些制劑，并努力改進您的無菌技術并開發一個系統來保持您的二氧化碳培養箱清潔。
 
       培養箱污染的主要來源是微生物通過檢測門進入。這可能是顯而易見的，但將它放在**要位置將有助于您發展防止全面污染的長期習慣。在培養箱中放置物品時應戴手套，并盡量減少內部玻璃門打開的時間。偶爾用70％乙醇擦拭門把手。每周更換一次，保持濕度盤中的水清潔。定期用肥皂和水擦洗鍋，然后用乙醇擦拭; 或者，高壓滅菌鍋。如果培養基溢出二氧化碳培養箱內，請取出擱板并*清潔。
 
       這些清潔儀式的頻率將取決于您培養箱獲得的流量。大型實驗室中的培養箱可能需要更頻繁的清潔。如果你從一個干凈的培養箱開始，并且注意進出的東西，它應該保持清潔數周或數月。
 
       確保二氧化碳水平是應該的
       大多數哺乳動物細胞培養基使用碳酸氫鹽緩沖系統。二氧化碳是這個緩沖系統的重要組成部分，保持在5％以維持介質在生理pH值。雖然基本上所有的現代化培養箱都配備了CO2傳感器以保持所需的CO2水平，但隨著時間的推移，校準可能會偏離設定值，需要操作員直接確定CO2水平時進行偏置重新校準。
 
       測量培養箱中CO2水平最準確的方法是使用氣體分析儀，氣體分析儀的操作基于待測氣體的化學吸收之后的流體的體積膨脹。該設備使用室內空氣（0.04％CO2）“歸零”，培養箱中的空氣通過門或孵化器側的端口進行采樣。
 
       較舊的模型培養箱可能需要更頻繁的重新校準。新型號每個月執行一次CO2傳感器的自動重新清零。雖然這些模型很少需要手動重新校準，但用戶仍應按照其標準操作程序的規定，檢查腔室二氧化碳水平。
 
       保持37°C的溫度
 
       在我們的身體努力保持核心溫度37°C的情況下，在這種溫度下培養的哺乳動物細胞是幸福的，這并不奇怪。大多數二氧化碳培養箱都配備了顯示內腔溫度的顯示屏，但定期仔細檢查一下是個不錯的主意，特別是當您注意到細胞生長不理想或不常見時。打開外部和內部的培養箱門，并將溫度計帶到玻璃門的內部，以便在玻璃門關閉時從外部讀取溫度。在你離開實驗室前**做這件事。第二天早上，打開培養箱的外門并讀取溫度計。再一次，如果讀數不同于37°C（并且溫度計準確），則需要重新校準板載溫度傳感器。
保持潮濕
 
       您的培養箱內部保持在相對較高的溫度下，因此培養基的蒸發在沒有高濕度的情況下會成為一個真正的問題。通過將水保持在培養箱底部的托盤中，保持培養箱內相對濕度較高（90％**95％）。其缺點是充水盤是潛在的污染源。