普通培養箱改為CO2培養箱及在雜交瘤中的應用

       材料與方法

       將三角形橡膠密封條和醫用乳膠管用市售強力膠封閉內箱接縫處及玻璃內門：除去箱頂溫度計，箱內掛入干濕溫度計(可在玻璃內門處觀察溫、濕度)：原溫度計孔以橡膠塞密封后打孔安裝二氧化碳培養箱入氣管和排氣管，連接CO2鋼瓶與CO2入氣管，排氣管用鐵夾夾閉；

       普通氧氣流量表控制CO2流量，濕化瓶內盛10硫酸銅水溶液(可抑制霉菌生長)；內箱底層置一方盤盛水(可保持箱內相對濕度在70以上)。測量內箱長、寬、高，計算容積為600m3,開放排氣管，調節CO2流量在10升：分，持續3分鐘，進氣30升。此時箱內CO2理論含量應為50,夾閉排氣管。

       我們用CO2檢測管測得CO2實際含量為5±0.20.24小時后CO2含量下降約0.50,左右，可用CO2持續微量補充(以20個氣泡分計)來衡定控制溫度在370.5℃

       使用注意

       1.環境盡量保持清潔二氧化碳培養箱定期熏蒸消毒，及時更換濕化瓶內的硫酸銅溶液，以防止霉菌生長和支原體污染。

       2.平時短、頻繁地開啟可不必補充CO2,使用完畢后按要求及時重新調整CO2含量。

       3.由于該二氧化碳培養箱外門無電熱裝置，導致玻璃門內外溫差而出現的冷凝水，一般無不良影響。有條件者可在外門夾層加電熱絲解決。

       4.因箱內無氣體循環系統，CO2與空氣混勻度未必一致，但實驗結果證明并無影響。
討論我們應用該二氧化碳培養箱進行載脂蛋白B100單克隆抗體(apo100cab)雜交瘤細胞系的建株實驗，獲得成功。培養的小鼠SP20-Ag14骨髓瘤細胞系及小鼠脾細胞、腹腔巨噬細胞、雜交瘤細胞等均生長良好，平均融合率為666克隆化培養后所獲的3株apoB0 ) McAb雜交瘤細胞系誘生的腹水中McAb效價均為1:3200( ELISA)：細胞株經液氮保存、傳代與凍融一年多，仍能持續穩定地分泌高滴度的McAb實踐證明，這一裝置性能穩定，使用方便，經濟可靠，并可根據需要調整CO依度，可*替代昂貴的自動CO2孵箱，對普通實驗室及基層單位進行細胞培養和制備單充隆抗體具有廣泛的推廣價值。

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